LUYOR-3260黑光灯精斑检测和精斑鉴定的应用

LUYOR-3260黑光灯精斑检测

精斑检测和检验

法医鉴定中，涉及强奸、强奸杀人、猥亵、离婚、亲子鉴定等案件，有时需要作精液（斑）检验。精斑检测对确定案件性质、提供侦查线索和证据，具有一定的意义。LUYOR-3260黑光灯经常被法医在案发现场用于精斑的搜索和发现。

一、精斑的预试验

精液是睾丸生成的精子和前列腺、精囊和尿道球腺分泌液的混合物，具有特殊的气味，因附着物不同形态也不同，在暗色布质上，精斑浓厚时，呈灰白色，似浆糊状，稀薄时不易察见；在白色布质上，呈黄白色，边缘较中间明显；以手触之有硬感。用放大镜观察，可在表面或布纤维中见黄白色鳞状小片。对发现的可疑斑痕，应首先进行预试验，其方法有以下几种：

1．紫外线检查

精斑在LUYOR-3260大面积黑光灯照射下呈银白色荧光，周围较深，带紫蓝色边缘。经水洗涤残留于布质纤维中的精斑，在 LUYOR-3260黑光灯照射下下仍可见点状荧光，借此可以发现精斑所在的部位。人体其他分泌物的斑痕，如汗液斑、尿斑、阴道分泌物、乳汁、鼻涕等，以及肥皂、浆糊斑、某些药物、化学纤维制品，在LUYOR-3260大面积紫外线手电筒照射下也可显现与精斑相类似的荧光。因此，在紫外线手电筒下出现银白色荧光，不是精斑的特异性反应，不能作为确定精斑的根据。

黑光灯下的精斑

2．碘化碘钾结晶试验

精斑中卵磷脂逐渐析出胆碱，胆碱遇碘则形成过碘胆碱结晶。剪取可疑斑痕少许，置于玻片上，加试剂（碘化钾1．65克、碘2．54克、加水30毫升）1—2滴加盖玻片镜检，初见褐色颗粒，逐渐演变成针状结晶，然后则为褐色菱形结晶，结晶不稳定，于生成后1—3小时可消失。此结晶并非精斑特异性反应，凡含有胆碱的物质（阴道粘液、子宫分泌物、脓液、鼻涕、唾液以及肝、肾等脏器）也可形成结晶。因此，检见结晶只能推断是精斑的可能，而不能确定就是精斑。

3．酸性磷酸酶检验

精液中含有前列腺液，有大量酸性磷酸酶，对可疑斑迹进行检测，可作为精斑的预试验。

精液中的酸性磷酸酶．在合适的温度环境与酸性溶液中，可分解磷酸苯二钠，释放出酚。酚经氧化剂铁氰化钾的作用，与氨基安替比林结合，产生红色酮类化合物，随检材中精斑的不同浓度而呈深浅不同的红色，浓度过高，可出现红色沉淀；阴性反应为橙黄色。精液稀释至2万倍，仍可呈阳性反应。

这种方法具有简便、灵敏、迅速和不破坏检材的完整性等优点。但特异性较差，酸性磷酸酶除存在于前列腺外，还广泛分布在人体血液、阴道分泌物、唾液、尿液以及胰、脾等脏器内。利用精液所含酸性磷酸酶浓度显著高于其他体液的特点6，还可作精液检验的确证试验，如果酸性磷酸酶浓度大于300单位／毫升，可推定为精斑，大于500单位／毫升，可靠性更大。

黑光灯照射下的精斑

二、精斑的确证试验

确定精斑最可靠的方法是检出精子和用抗人精液血清沉淀反应，以及检测人精浆特异蛋白。

1．精子检查

新鲜精液加少量生理盐水，镜检，视野下可见活的或死的精子。人的精于为蝌蚪状，头部平面呈椭圆形，侧面呈梨形，中间部呈圆柱状，尾部细长（见附图69）。精斑中的精子不易破坏，较牢固地附着在纤维基质上。检验时需将检材用生理盐水浸软，细心分离布纤维，待自然干燥后，固定2—3分钟，用苏木素——伊红染色2—5分钟，镜检。如有精子即被染色，精于头部的后半部（即核）染成蓝色，前半部不着色或浅染，精于中间部及尾部染红色。有条件的也可用扫描电镜检查精子，检材用缓冲液浸渍后，不需染色，即可检出精子。

黑光灯

2．抗人精液血清沉淀反应

用人精液注射家兔，制备抗人精液免疫血清，用此抗血清与检材浸出液作沉淀反应，阳性反应表明检材含有人的精斑。本法灵敏度较高，检出率远比精子检出法为高，对无精子精液或输精管结扎后的精液更具有实用价值。

检验步骤是：一般经紫外线检查，确定精斑的范围，用盐水浸出后，离心（2500／分）5分钟，取上清液作抗人精液沉淀反应，用沉渣涂片染色寻找精子，两者均呈阳性便可确定为人精斑。但陈旧精斑，有时只有沉淀反应为阳性，如果该抗人精液血清具有高度特异性，也可作出结论，关键在于制备价的特异性抗人精液血清。如果较为新鲜的精斑，沉淀反应为强阳性，而无精子检见，则可推断嫌疑人精液中无精子或作过输精管结扎术。

操作方法是：取检材盐水浸出液作两种不同稀释度（即浸液、浸液5倍、10倍稀释），与抗人精液沉淀素血清作环状沉淀反应，60分钟内出现沉淀环为阳性反应。同时应作无斑痕的空白对照和已知人精斑浸出液及其他有关斑痕（阴道液斑、血痕等）的盐水浸出液对照。

手电筒式黑光灯

3．人精浆中P30的检验

人精液所特有的抗原成分P30，为确认人精液提供了一个非常有价值的标志物。近年来国内外学者从人精浆中分离到一种由前列腺分泌的糖蛋白，其分子量约为30000，它具有较强的免疫性，是精液中特有的主要抗原成分。

精浆特异蛋白P20的检验在英国已经作为精斑确证试验的常规方法，在我国也已于1987年试制成功抗P30血清，目前正在全国推广中。

三、精斑的血型测定

精液是一种分泌液，其中含有血型抗原A、B、H等，可用吸收法、热解离法、混合凝集法测定精液斑的血型。

检验方法与血痕的血型检验方法相同。但是，由于精斑血型物质的分泌量不同，非分泌型和O型的反应结果不好区别，因此应加作抗H血清凝集反应，以便确定所属血型。有的案件还应提取有关的血液和唾液等进行血型测定，以便对照。

有些精斑为混合斑，单用上述方法检验所得出的结果，不一定是精斑的血型。例如，罪犯是A型分泌型，被害人为B型分泌型，则混合斑的血型可能是AB型，而不是罪犯的血型。对于这类混合斑的血型测定，应先用电泳法分离精斑和阴道分泌物，然后分别测定精液和阴道分泌物的血型，这样才能作为认定或否定罪犯的依据。

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